化橘红中禁用农药多残留测定的整体解决方案——2025版中国药典 2341 农药残留量测定法 第五法
1.1 标准品的配置：
外标：CDAA-M-490696-JZ-1.2 mL，73种禁用农药混标(2025 药典 2341 第五法/0212 通则)，2-20 mg/L于乙腈，1.2 mL。
混合外标中间液：0.2-2 mg/L于乙腈。
内标：CDAA-S-412134-JD-1 mL，三苯基磷酸酯（药典 2341 通则内标)，1000mg/L 于乙腈，1 mL。
内标中间液：100 ng/mL于乙腈。
1.2 样品前处理：
1.2.1.直接提取法：
取供试品粉末5 g，过3号筛置100 mL离心管，加入1 g氯化钠（SBEQ-CA8921-BZ），立即摇散，接着加入50 mL 乙腈后，匀浆处理2 min（转速不低于12000 rpm/min），4000 rpm离心5 min，分取上清液。沉淀继续加入50 mL 乙腈，匀浆处理2 min（转速不低于12000 rpm/min），4000 rpm离心5 min，合并两次提取的上清液。将合并后的提取液减压浓缩至约5~10 mL，放冷后接着用乙腈稀释至25 mL，混匀即得。
1.2.2.快速样品处理（QuEChERS）法：
取供试品粉末3 g，过3号筛置50 mL具塞离心管，加入15 mL 1%冰醋酸水溶液，涡旋使药粉充分浸润，静置30 min，接着加入15 mL 乙腈，涡旋震荡5 min，随后加入7.5 g无水硫酸镁/无水乙酸钠（4/1，w/w）（SBEQ-CA8115-BZ），立即摇散，涡旋震荡3 min后置冰水浴冷却10 min，4000rpm离心5 min，即为提取液，取10 mL提取液置预先装有净化材料的分散固相萃取净化管（无水硫酸镁900 mg，PSA 300 mg，C18 300 mg，Si 300 mg，GCB 90 mg）（SBEQ-CA8773-25）中涡旋震荡5 min，4000rpm离心5 min，即得。
1.2.3. 固相萃取法：固相萃取净化方式包括以下三种。
方式一：取直接提取法或QuEChERS法提取溶液5 mL置于装有分散型净化材料的净化管(无水硫酸镁1200mg，PSA 300mg，C18 100mg)(SBEQ-CA8456-25)中，涡旋震荡5 min，4000rpm离心5 min，取上清液，即得。
方式二：取直接提取法或QuEChERS法提取溶液5 mL通过亲水亲油平衡材料(HLB SPE)固相萃取柱(200mg，6ml)(SBEQ-CA6685)净化，收集全部净化液，即得。
方式三：取直接提取法或QuEChERS法提取溶液2 mL，置GCB/NH2复合固相萃取小柱(500mg/500mg,6ml)(SBEQ-CA5069)[临用前用乙腈-甲苯混合溶液(3:1)10 mL预洗]，用乙腈-甲苯混合溶液(3:1）20 mL洗脱，收集洗脱液，减压浓缩至近干，用乙腈转移稀释至2.0 mL，即得。
1.3 仪器检测：
1.3.1. GC-MS/MS检测：
分别精密吸取上述溶液各1 mL，加入内标中间液0.1 mL混匀，过0.22 μm有机相尼龙针式滤器(SCAA-104)取续滤液即得。
1.3.2. LC-MS/MS检测：
分别精密吸取上述溶液各1 mL，精密加入水0.3 mL，混匀，过0.22 μm有机相尼龙针式滤器(SCAA-104)取续滤液即得。
二
仪器条件
2.1
GC-MS/MS检测：
Agilent 8890-7000D 三重四级杆气质联用仪
2.1.1. 色谱条件：
a)色谱柱：CD-50plus气相毛细管色谱柱(30 m*0.25 mm*0.25 μm，货号：GAEQ-501301)；
b)进样口温度：250℃；
c)流速：1.0 mL/min；
d)进样量：1 µL；
e)进样方式：不分流进样；
f)升温程序：初始温度60℃，保持1 min，以30℃/min升至170℃，再以2℃/min升至230℃，最后以每分钟15℃升至300℃，保持6 min。
2.1.2. 质谱条件：
a)离子源：电子轰击源(EI)，电离能量70eV；
b)离子源温度：250℃；
c)传输线温度：250℃；
d)溶剂延迟：5 min；
e)监测模式：多反应监测(MRM)模式。
定性离子、定量离子、碰撞电压见下表2.1。
注：由于化合物较多，具体具体质谱条件请咨询安谱实验。
2.2
LC-MS/MS检测：
安益谱 TQ9100-SPH1299三重四级杆液质联用仪
2.2.1. 色谱条件：
色谱柱：Athena UHPLC C18 液相色谱柱，(2.1 x 100 mm,1.8 μm；货号：LAEQ-2110UA)；
柱温：40℃；
进样体积：2 μL；
流速：0.30 mL/min。
流动相梯度洗脱程序见下表2.2。
2.2.2. 质谱条件：
a)离子源：电喷雾(ESI)离子源；
b)扫描模式：正、负离子扫描模式；
c)监测模式：多反应监测(MRM)模式；
d)离子源温度：400℃。
定性离子、定量离子、碎裂电压和碰撞能量见下表2.3。
注：由于化合物较多，具体质谱条件请咨询安谱实验。
三
实验谱图
四
实验数据
表4.1 化橘红片GC-MS/MS加标回收率数据
表4.2 化橘红片LC-MS/MS加标回收率数据
注意事项：
1、由于基质与前处理方式不同，相同物质在不同基质或相同物质在不同前处理方法中回收率均可能存在不稳定情况。
2、杀虫脒、对硫磷、甲拌磷、氯唑磷等20种目标物可分别在GC-MS/MS和LC-MS/MS两种仪器上进行检测，可根据实际情况选择其中一种仪器的检测结果。
3、一般情况下，一种基质建议选择一种合适的前处理方法以同时满足GC-MS/MS和LC-MS/MS的检测需求；如一种方法无法同时满足，可选择多种合适的方法以同时满足73种目标物的回收率需求。
4、使用QuEChERS方法，由于方法原因，杀虫脒通常回收率偏低，但在不同基质中也可能存在回收率不稳定情况。
5、化橘红片在GC-MS/MS检测方法下，以QuEChERS进行提取，方式二净化后，六氯苯、三氯杀螨醇、DDT、灭蚁灵等物质回收率较低。
6、化橘红片在LC-MS/MS检测方法下，以直接提取法提取，方式一或方式三净化，磺隆类物质基本没有回收；以QuEChERS进行提取，方式一净化，磺隆类物质回收率正常，方式三净化，磺隆类物质存在偏低情况。
五
实验结果
化橘红基质加标水平为0.01-0.1 mg/kg，直接提取法-方式一净化、直接提取法-方式三净化、QuEChERS法提取-方式二净化和QuEChERS法提取-方式三净化均存在部分目标物回收率偏低情况；直接提取法-方式二净化、QuEChERS法和QuEChERS法提取-方式一净化这三种方法所有化合物均在60-120%左右，可满足2341 第五法 药材及饮片（植物类）中禁用农药多残留测定法回收率要求，可实现化橘红基质中73种禁用农药的测定。
使用安谱璀世标准物质、安谱实验相关前处理耗材、CNW CD-50plus 气相毛细管色谱柱、CNW Athena UHPLC C18 液相色谱柱及其他耗材可以高质量完成植物类中药材及饮片中73种禁用农药的检测。
六
产品信息
